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凝胶渗透色谱的实验部分

1、凝胶渗透色谱（GPC）法测定聚合物分子量及分子量分布主要内容实验目的实验原理实验仪器实验步骤数据分析思考题实验报告要求实验目的了解GPC法测定聚合物分子量及分子量分布的原理。了解Waters1515/2414型凝胶渗透色谱仪的构造。

2、中等体积的分子产生部分渗透。小分子可渗透到凝胶孔穴里去而受阻滞，因有一个平衡过程而较晚地被流动相冲洗出来。这样，试样组分基本上按分子大小受到不同阻滞而先后流出色谱柱，从而实现分离目的。

3、凝胶色谱法又称为凝胶过滤法、凝胶层析、凝胶渗透层析、通透层析、分子筛层析。

4、凝胶的代表是葡萄糖系列，洗脱溶剂主要是水。

5、凝胶色谱主要用于高聚物的相对分子质量分级分析以及相对分子质量分布测试。目前已经被生物化学、分子生物学、生物工程学、分子免疫学以及医学等有关领域广泛采用，不但应用于科学实验研究，而且已经大规模地用于工业生产。

6、GPC实验室为了检测物质的分子量分布，样品浓度大与小，只会影响整个色谱图谱的大小，不会对整个数据产生较大影响。当然，样品太稀会导致两头的数据有较大的误差。

1、基本原理是指混合溶质的分子按其分子量的大小不同，分别先后流出色谱柱而被分离。

2、凝胶色谱是根据多孔凝胶对不同大小分子的排助效应进行分离。

3、分离原理：一个含有各种分子的样品溶液缓慢地流经凝胶色谱柱时，各分子在柱内同时进行着两种不同的运动：垂直向下的移动和无定向的扩散运动。

4、原理是：在网状结构中，介质被包围在网眼中间，不能自由流动，因而形成半固体。由于构成网架的高分子化合物或线性胶粒仍具有一定的柔顺性，所以整个凝胶也具有一定的弹性。

5、凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质。凝胶色谱法获得纤维素酶的原理是：凝胶色谱法的固定相为多孔性凝胶类物质，流动相为水溶液或有机溶剂，是根据不同组分子体积的大小进行分离的。

6、凝胶色谱法分离蛋白质原理：大分子物质由于直径较大，不易进入凝胶颗粒的微孔，而只能分布颗粒之间，所以在洗脱时向下移动的速度较快。

凝胶渗透色谱检测器_凝胶渗透测试

GPC是凝胶渗透色谱，又称为尺寸排阻色谱，它是基于体积排阻的分离机理，通过具有分子筛性质的固定相，用来分离相对分子质量较小的物质，并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子同系物。

区别在于GPC是凝胶渗透色谱，又称为尺寸排阻色谱，它是基于体积排阻的分离机理，通过具有分子筛性质的固定相，用来分离相对分子质量较小的物质，并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子同系物。

gpc的意思是凝胶渗透色谱，又称为尺寸排阻色谱，它是基于体积排阻的分离机理，通过具有分子筛性质的固定相，用来分离相对分子质量较小的物质，并且还可以分析分子体积不同、具有相同化学性质的高分子同系物。

先纠正一下，凝胶渗透色谱（GPC）是以有机溶剂为流动相的，用水做流动相的叫凝胶过滤色谱（GLC），两者都是分子排阻色谱。

什么叫参数确定？直接把样品溶解后过滤，注射到GPC上就行了，结果的参数是根据自己在图上画的基线和积分范围确定的。

GPC实验室为了检测物质的分子量分布，样品浓度大与小，只会影响整个色谱图谱的大小，不会对整个数据产生较大影响。当然，样品太稀会导致两头的数据有较大的误差。

中等体积的分子产生部分渗透。小分子可渗透到凝胶孔穴里去而受阻滞，因有一个平衡过程而较晚地被流动相冲洗出来。这样，试样组分基本上按分子大小受到不同阻滞而先后流出色谱柱，从而实现分离目的。

每根色谱柱都有一定的相对分子质量分离范围和渗透极限，色谱柱有使用的上限和下限。

凝胶层析与分子形状有关，一般marker都是球状蛋白，所以测球状蛋白分子量较准。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳与分子形状无关。有些蛋白性质特殊，不适于用SDS-凝胶电泳法测定。